Bithmhicroscopy maidir le toirt na mbloic fíocháin
Micreascópacht Bhitheolaíoch Go dtí seo, is gnáth-mhodhanna iad fosúchán fuar, alt ultrathin reoite agus reoite-thriomú le haghaidh micrea-ghearrthóga fíocháin agus cille x-ghathaithe. Mínítear sonraí an mhodha seo mar seo a leanas:
Maidir le micreascóip bitheolaíocha le comhdhlúthadán, is féidir an comhdhlúthadán a bhogadh suas agus síos chun an gile a dhéanamh measartha, agus is féidir oscailt an tsolais inathraithe a athrú freisin chun gile measartha 9b a bhaint amach. Má tá an solas grianmhar, is féidir an comhdhlúthadán a ardú go cuí, agus is féidir oscailt na foinse solais inathraithe a mhéadú go cuí. Má tá an solas ró-láidir, is féidir an lionsa comhdhlúthadáin a ísliú go cuí, agus is féidir oscailt an tsolais trasnaithe a laghdú go cuí. Má bhraitheann tú fós dazzling sa chás seo, is féidir leat scagaire cuí a roghnú agus é a chur ar an lúibín faoin gcomhdhlúthadán. Beidh an darach seo in ann an gile a shásaíonn tú a fháil. Ar ndóigh, chun suíomhanna uachtaracha agus íochtaracha an chomhdhlúthadáin a choigeartú, méid Cró na léitheoireachta optúla athraitheach a choigeartú agus scagaire oiriúnach a roghnú, tá gá le tréimhse áirithe cleachtais chun taithí a fháil.
Saincheist an-tábhachtach i micreascópacht bhitheolaíoch ná go bhfuil 65 eilimint i ngach cuid sa phróiseas samplála agus scaradh cealla, tar éis reo-thriomú agus leabú roisín (FD), tar éis comhiomláin ultra-tanaí a reo, agus tar éis reo-thriomú. Ní mór a láimhseáil go cúramach. Ní féidir damáiste a dhéanamh do na cealla atá le hanailísiú. Toisc go mbaineann micrea-anailís X-gha, ní hamháin go leor céimeanna, ach cosnaíonn sé go leor freisin. Má dhéantar cealla damáiste nó cealla marbha ar na cealla anailísithe tar éis próiseáil fhada agus ilchéime, tá sé an-aiféala conclúidí mícheart a tharraingt. Mar shampla, tá dhá chruth ag cardiomyocytes scartha le cóireáil collagenase, tá ceann amháin slat-chruthach fada, agus tá an ceann eile cruinn. Is cealla bás iad an dara ceann a ndéantar damáiste dóibh le linn aonrú cille.
Bithmhicreascópacht Tá méid agus dáileadh na leictreailítí sa dá chineál cealla seo an-difriúil. Tá Na an-ard agus tá K an-íseal i gcáirdiomyocytes ciorclach, agus tá an tiúchan ca i néimeatóidí an-ard. Tar éis seiceáil le modhanna anailíse eile, cruthaítear go bhfuil an ard Na agus íseal K de chealla bhabhta agus an ard Ca i mitochondria mar gheall ar damáiste an membrane cille le linn an phróisis scaradh cille. De ghnáth is é modh fosaithe fuar-oighear cealla agus fíocháin ná múchadh agus fosúchán a ghlacadh ar dtús, agus ansin iad a stóráil i nítrigine leachtach. Tá an fosúchán múchadh an-tábhachtach maidir le héifeacht an chaomhnaithe. Tá cealla beo nó fíocháin úra saibhir in uisce. Nuair a bhíonn siad ag múchadh, is minic a reoitear agus a shocraítear na codanna de na cealla nó na fíocháin atá i dteagmháil dhíreach leis an cuisneán brúite (go háirithe nuair a bhíonn siad ag múchadh le nítrigin leachtach) ar dtús, rud a chruthaíonn "bhlaosc", rud a chuireann bac ar na codanna lárnacha de na cealla. brúite agus fuar-seasta. Dá bhrí sin, nuair a dhéantar anailís micrea-limistéar X-líne, is minic a aimsítear go bhfuil criostail oighir i lár na gcealla níos mó. Chun é seo a chosc, úsáidtear substaint a bhfuil leáphointe níos airde ná sin de nítrigin leachtach ach níos ísle ná sin de 806c mar chuisneán briste. Tá go leor substaintí den sórt sin ann, ach is é an ceann is saoire própán tiubhaithe (fiuchphointe - 42.120c, pointe leá - 187.10c, meáchan móilíneach 44.1), agus is é an luas fuaraithe an ceann is tapúla. Ach is é an míbhuntáiste atá aige ná go bhfuil sé inadhainte.
Is féidir le micreascóp bitheolaíoch an snáithín muscle a chur ar raca speisialta, ionas nuair a shroicheann an crapadh snáithíní matáin céim áirithe agus ní mór é a shocrú, tosú láithreach ar an soc chun própán leachtach a spraeáil chuig an snáithín muscle chun é a scor agus a shocrú. Ansin tógadh na snáithíní matáin mar aon leis an bhfráma amach agus cuireadh iad i nítrigine leachtach. Má shocraítear cealla fola nó cealla scoite, dírigh na cealla ar dtús trí lártheifneoiriú ar luas íseal, aistrigh na cealla go vial airgid le seoltacht teirmeach maith, cuir an vial i própán leachtach, agus reo le haghaidh fosúchán. Nuair a bhí an briseán francach á shocrú i saotharlann an Halla, rinneadh an dá bhloc cruach a réamh-fhuaraithe le héiliam leachtach (nó nítrigin leachtach), agus clampáladh an dá bhloc copair le forceps agus cuireadh iad ar thaobh tosaigh agus ar chúl an briseán chun múchadh agus a shocrú. an briseán. Is féidir fíocháin nó cealla a stóráil i nítrigin leachtach le haghaidh stórála fadtéarmach tar éis múchadh agus socrú.
Micreascópacht Bhitheolaíoch Chomh maith leis an modh alt ultrathin reoite is mó meas, tá anseo teicníocht sil-leagan eile a úsáideann eolaithe. Cuirtear substaint le dríodar a dhéanamh agus an chomhpháirt a bhfuil anailís le déanamh uirthi chun é a dhíluaileadh roimh anailís, agus déantar anailís ar an dríodar ansin. Mar shampla, is minic a úsáideann daoine oxalate agus pyroantimonate chun ca a thaisceadh i gcealla muscle. Níl an chéad cheann íogair go leor don tiúchan íseal Ca sa chíteaplasma; Tá pyroantimonate níos íogaire agus féadann sé taiscí leictreon-dlúth a fhoirmiú le Ca saor in aisce san inchinn, ach níl pyroantimonate ag luí le sóidiam, mangainéis, bhairiam, iarann Déantar taiscí freisin agus níl siad chomh sonrach. Tá an próiseas ullmhúcháin eiseamail cosúil le hullmhú eiseamail alt ultrathin gnáth-mhicreascóp leictreon tarchurtha, is é an difríocht ná go socraíodh 3 faoin gcéad pyroantimonate potaisiam (saile maolánach fosfáit, pH 7.6) ar feadh 6 uair an chloig roimh an socrú, agus ar na hailt ultrathin matáin dhaite, Chonacthas taiscí dubha i lárlínte na mbandaí A agus 2 de gach sarcomere, agus úsáideadh rannóga neamhdhaite le haghaidh micrea-anailís X-gha. Baineadh úsáid as tetrahidreaclóiríd Diaminobenzidine (DAB) chun substaintí a bhfuil heme iontu a deascadh agus mar sin de. Is féidir an meascán d'imoibriú deascadh histochemical agus droichead micrea-dhifreála x-gha a mheas i saotharlanna nach bhfuil coinníollacha alt ultrathin reoite acu. Is féidir leathchainníochtúil a dhéanamh de réir buaicairde na n-eilimintí atá le hanailísiú
