Samplaí bitheolaíocha a ullmhú agus a bhreathnú do mhicreascópacht leictreoin
Braitheann réiteach an mhicreascóp ar thonnfhad an tsolais a úsáidtear, thosaigh an micreascóp leictreon le feiceáil i 1933 mar gheall ar úsáid tonnfhad i bhfad níos giorra ná solas infheicthe an bhíoma leictreon mar fhoinse solais, ionas go mbeidh an réiteach aige. is féidir a bhaint amach ná an micreascóp optúla feabhsaithe go mór. Cinneann an fhoinse solais éagsúla freisin sraith difríochtaí idir an micreascóp leictreon agus an micreascóp optúil.
De réir na ndifríochtaí i bprionsabal íomháithe an bhíoma leictreon agus ról an tsampla ar na bealaí éagsúla, forbraíodh an micreascóp leictreon nua-aimseartha chun roinnt cineálacha a fhoirmiú, faoi láthair * a úsáidtear go coitianta é an micreascóp leictreon tarchurtha agus an leictreon scanadh. micreascóp, is féidir leis an iar a bheith i raon na 1,000-1,000,000 uair an formhéadú iomlán ar an raon na n-athruithe, is féidir leis an dara ceann a bheith i formhéadú iomlán an { {4}},000 méadaithe iomlán na n-athruithe idir. Díríonn an turgnamh seo ar shamplaí a ullmhú don dá chineál micreascóip, leictreon-mhicreascóp tarchuir agus leictreon-mhicreascóp scanadh.
Ábhair
1. Brú Escherichia coli (Escherichia coli, Escherichia coli) leataobhach.
2. Tuaslagáin nó imoibrithe Aicéatáit amile, aigéad sulfarach tiubhaithe, eatánól ainhidriúil, uisce steiriúil, aigéad fosfatungstach 2% sóidiam (pH 6.5-8.{4}}) tuaslagán uiscí, 0.3% formaildéad polaivinile (tuaslagtha i trichloromethane) tuaslagán, cytochrome c, aicéatáit amóiniam, plasmid pBR322.
3. Ionstraimí nó paraphernalia Gnáthmhicreascóp optúil, mogalra copair, tonnadóir poircealláin, eascra, mias comhréidh, burette steiriúil, tweezers steiriúla, lancet, sleamhnáin, ** pláta comhaireamh, cóta bhfolús, triomadóir pointe criticiúil agus mar sin de.
Céimeanna oibríochta
(I) Ullmhúchán samplach agus breathnóireacht ar mhicreascópacht leictreoin tarchuir
1. Cóireáil mogalra miotail
Cuirtear samplaí le haghaidh micreascópachta optúla ar na sleamhnáin le haghaidh breathnóireachta. Mar sin féin, i micreascópacht leictreoin tarchurtha, toisc nach féidir le leictreoin dul isteach sa leathán gloine, ní féidir ach ábhar mogalra a úsáid mar iompróir, ar a dtugtar mogalra iompróra de ghnáth. Is féidir an mogalra iompróra a roinnt ina go leor sonraíochtaí éagsúla mar gheall ar ábhair agus cruthanna éagsúla, arb é an * a úsáidtear go coitianta an mogalra copair 200-400 (líon poill). Ba chóir go gcaithfí mogalra copair roimh úsáid chun an salachar air a bhaint agus é a choinneáil glan, ar shlí eile beidh tionchar aige ar cháilíocht an scannáin tacaíochta agus ar shoiléireacht na ngrianghraf eiseamail. Is é an mogalra copair a úsáidtear sa turgnamh seo ná 400 mogalra, ar féidir é a chóireáil ar an mbealach seo a leanas: ar dtús, bleach é le haicéatáit amile ar feadh cúpla uair an chloig, ansin sruthlaigh é le huisce driogtha ar feadh roinnt uaireanta, agus ansin bleach é in eatánól ainhidriúil le haghaidh díhiodráitiú. Mura bhfuil an mogalra copair leis an modh thuas fós glan, is féidir é a úsáid chun aigéad sulfarach tiubhaithe (1:1) a chaolú i 1 ~ 2 nóiméad, nó i dtuaslagán NaOH 1% bruite ar feadh roinnt nóiméad, a rinsáil arís agus arís eile le huisce driogtha. , a chuirtear i díhiodráitiú eatánóil ainhidriúil, le húsáid.
2. Scannán tacaíochta a ullmhú
Sa bhreathnóireacht samplach, ba chóir go mbeadh an líonra iompróra clúdaithe freisin le sraith de scannán neamhstruchtúrtha, aonfhoirmeach, ar shlí eile beidh samplaí beaga ag sceitheadh as na poill sa líonra iompróra, is gnách go dtugtar an scannán tacaíochta nó an scannán iompróra ar an gciseal scannán seo. Ba cheart go mbeadh an scannán tacaíochta trédhearcach do leictreoin, agus ba cheart go ginearálta go mbeadh a thiús níos lú ná 20nm; faoi thionchar an bhíoma leictreon, ba cheart go mbeadh neart meicniúil áirithe ag an scannán freisin, is féidir leis cobhsaíocht an struchtúir a choimeád, agus tá seoltacht theirmeach maith aige; ina theannta sin, níor cheart go mbeadh aon struchtúr infheicthe ag an ngréasán tacaíochta faoin micreascóp leictreon, agus níl imoibriú ceimiceach aige leis an sampla a iompraítear, agus ní chuireann sé isteach ar bhreathnú an tsampla, agus go ginearálta tá a thiús thart ar 15nm. Is féidir an scannán tacaíochta a dhéanamh de scannán plaisteach (m.sh. scannán cadáis dóiteáin, scannán formaildéad poileitiléin, etc.), scannán carbóin nó scannán miotail (m.sh. scannán beirilliam, etc.). Faoi ghnáthchoinníollacha oibre, is féidir na ceanglais a chomhlíonadh le scannán plaisteach, agus tá ullmhú an scannáin phlaisteacha sa scannán greamaitheacha cadáis dóiteáin sách éasca, ach níl an neart chomh láidir le scannán formaildéad poileitiléin.
