Cinneadh ar líon na miocrorgánach - an modh comhaireamh díreach an micreascóp!
Léirítear fás daonra baictéarach trí mhéadú ar líon na gceall nó méadú ar mhais cheallacha. Áirítear ar na modhanna chun líon na gcealla a chinneadh modh comhaireamh micreascóp díreach, modh comhaireamh coilíneachta pláta, modh cóimheas ola fhótaileictreach, modh uasta dóchúlachta, agus modh scagacháin membrane. Áirítear ar na modhanna chun ábhar cille a thomhas meáchan tirim cille a chinneadh, comhpháirteanna cealla áirithe a chinneadh mar ábhar nítrigine, RNA agus DNA, agus meitibilítí a chinneadh. I mbeagán focal, tá go leor modhanna ann chun fás na miocrorgánaigh a thomhas, agus tá a buntáistí agus a míbhuntáistí féin ag gach ceann acu, agus ba cheart iad a roghnú de réir an staid shonrach. Tugann an turgnamh seo isteach den chuid is mó modh comhairimh dhíreach micreascóp a úsáidtear go coitianta i dtáirgeadh agus i dtaighde eolaíoch.
1. Ceanglais Aidhm
1. Soiléiriú a dhéanamh ar phrionsabal an chomhairimh cille fola.
2. Máistir an modh chun microorganisms a chomhaireamh ag baint úsáide as cuntar cille fola.
2. Bunphrionsabail
Is modh simplí, tapa agus iomasach é modh comhaireamh díreach micreascóp chun méid beag fionraí den sampla atá le tástáil a dhéanamh ar sleamhnán gloine speisialta le limistéar agus toirt áirithe (ar a dtugtar cuntar baictéir freisin). Modhanna. Faoi láthair, is iad na cuntair baictéar a úsáidtear go coitianta sa bhaile agus thar lear ná: bord comhaireamh cille fola, cuntar baictéir Peteroff-Hauser agus cuntar baictéir Hawksley, etc. Is féidir iad a úsáid chun giosta, baictéir, spóir múnla agus fionraí eile a chomhaireamh, agus tá an bunphrionsabal mar an gcéanna. Tá toirt iomlán de 0 ag an dá chineál cuntair baictéir deiridh.02mm3 tar éis a bheith clúdaithe le gloine clúdaigh, agus níl an fad idir an ghloine chlúdaigh agus an sleamhnán ach 0.02mm, mar sin an ola is féidir lionsa cuspóir tumoideachais a úsáid chun cealla beaga cosúil le baictéir a bhreathnú agus a bhreathnú. comhaireamh. Chomh maith leis na baictéarmhéadair seo, tá modh meastacháin ann freisin maidir leis an gcóimheas idir limistéar an smearaidh agus achar an réimse radhairc a breathnaíodh go díreach faoin micreascóp, a úsáidtear go ginearálta le haghaidh scrúdú baictéareolaíochta ar bhainne. Tá na buntáistí a bhaineann le modh comhaireamh díreach micreascóp iomasach, tapa agus éasca le feidhmiú. Mar sin féin, is é an míbhuntáiste a bhaineann leis an modh seo ná gurb é an toradh tomhaiste de ghnáth suim na gcealla marbh agus beo. Faoi láthair, tá roinnt modhanna ann chun an t-easnamh seo a shárú, mar shampla an meascán de chultúr microchamber staining baictéir inmharthana (ghearr ama) agus coscairí rannáin cille a chur leis chun an cuspóir a bhaint amach chun baictéir inmharthana amháin a chomhaireamh.
Sa turgnamh seo, úsáideadh haemaicítiméadar mar shampla le haghaidh comhaireamh díreach micreascópach. Le húsáid an dá chineál eile cuntair baictéir, féach le do thoil treoracha gach monaróir. Is modh coitianta é comhaireamh díreach faoin micreascóp le haemocytometer chun miocrorgánaigh a chomhaireamh. Is sleamhnán gloine speisialta é an pláta comhaireamh, ar a bhfuil trí ardán déanta ag ceithre shliotán; tá an t-ardán níos leithne sa lár roinnte ina dhá leath ag sliotán gearr trasnánach, agus tá greille ar gach taobh den ardán. Tá gach greille roinnte ina naoi gcearnóg mhóra, agus is í an chearnóg mhór sa lár an seomra comhairimh. Léirítear struchtúr an phláta comhairimh cille fola i bhFíor l{{{{10}}}}. Tá dhá shonraíocht i gcoitinne ag scála an tseomra comhairimh, tá ceann cearnach mór roinnte ina 25 cearnach lár, agus tá gach cearnóg lár roinnte ina 16 cearnach beag (Fíor 15-2); cearnóg mhór is ea an ceann eile. Tá an cearnóg roinnte ina 16 cearnach lár, agus tá gach cearnóg lár roinnte ina 25 cearnach beag, ach is cuma cén cineál bord comhairimh é, tá 400 cearnach beag i ngach cearnóg mór. Is é 1mm fad taoibh gach cearnóg mhór, agus is é 1mm2 achar gach cearnóg mhór. Tar éis clúdach le gloine clúdaigh, is é 0.1mm an airde idir an ghloine clúdaigh agus an ghloine sleamhnáin, agus mar sin is é 0.lmm3 (an míleú cuid de millilítear) toirt an tseomra comhairimh. Figiúr 15-1 Struchtúr an bhoird chomhaireamh cille fola (1) Fíor 15-2 Struchtúr an bhoird chomhaireamh cille fola (2) A. Radharc tosaigh; B. Amharc alt fadaimseartha; An eangach méadaithe, is é an cearnóg mór sa lár an seomra comhairimh 1. Cealla fola pláta comhaireamh; 2. Gloine a chlúdach; 3. Nuair a bhíonn tú ag comhaireamh sa seomra comhairimh, de ghnáth déan líon iomlán na baictéir a chomhaireamh i gcúig chearnóg, agus ansin meán gach cearnóg a ríomh, agus iolrú faoi 25 nó 16 chun líon iomlán na baictéir i gcearnóg mór a thiontú ansin isteach sa líon iomlán na baictéir i 1ml de thuaslagán baictéarach. Bíodh líon iomlán na mbaictéar sna cúig chearnóg A, agus an cóimheas caolaithe den tuaslagán baictéarach a bheith B. Más pláta comhairimh é le 25 cearnach, líon iomlán na baictéir i 1 mL de thuaslagán baictéarach {{26} } A/5×25×104× B=50000A·B(píosaí) Mar an gcéanna, más pláta comhairimh é le 16 chearnóg mheánach, líon iomlán na mbaictéar i dtuaslagán baictéarach 1ml=A/ 5×16×104×B=32000A·B (píosaí)
3. Trealamh
1. Baictéir
Saccharomyces cerevisiae
2. Ionstraimí nó acraí eile
Hemocytometer, micreascóp, clúdach-duillín, dropper ribeach steiriúil.
4. Céimeanna oibríochta
1. Fionraí baictéarach a ullmhú
Ullmhaíodh Saccharomyces cerevisiae isteach i bhfionraí baictéarach de thiúchan cuí le saline fiseolaíoch steiriúil.
2. Seomra comhaireamh micreascóp
Sula gcuirtear samplaí leis, déan iniúchadh micreascópach ar sheomra comhairimh an phláta comhairimh. Má tá salachar ann, ní mór é a ghlanadh agus a thriomú roimh chomhaireamh.
3. Cuir sampla
Clúdaigh an hemocytometer glan agus tirim le clúdaigh, agus ansin bain úsáid as dropper ribeach steiriúil chun titim beag den fhionraí Saccharomyces cerevisiae shaken a scaoileadh ó imeall an chlúdaigh, agus lig don tuaslagán baictéarach bogadh go huathoibríoch feadh na bearna trí osmosis ribeach. Ag dul isteach sa seomra comhaireamh, is féidir an seomra comhaireamh ginearálta a líonadh le leacht baictéarach. Nuair a bhíonn tú ag sampláil, croith an tuaslagán baictéarach ar dtús; agus samplaí á gcur leis, níor cheart aon boilgeoga aeir a ghiniúint sa seomra comhairimh.
4. Comhaireamh micreascóp
Tar éis an sampla a chur leis, seas go fóill ar feadh 5 nóiméad, ansin cuir an hemocytometer ar an gcéim micreascóp, faigh suíomh an tseomra comhairimh ar dtús le micreascóp ísealchumhachta, agus ansin aistrigh chuig micreascóp ardchumhachta le haghaidh comhaireamh. Coigeartaigh déine an tsolais micreascóp go cuí. Maidir le micreascóip a úsáideann scátháin le haghaidh soilsiú, tabhair aird ar gan imeacht ó thaobh amháin den solas, ar shlí eile ní bheidh sé éasca línte cearnacha an tseomra comhairimh a fheiceáil go soiléir sa réimse radhairc, nó ní bheidh ach línte ingearacha nó línte cothrománacha. a fheiscint. Má aimsítear go bhfuil an tuaslagán baictéarach ró-chomhchruinnithe nó ró-chaolaithe sula ndéantar é a chomhaireamh, is gá an caolú a athcheartú roimh chomhaireamh. Go ginearálta, éilíonn an caolú sampla thart ar 5 go 10 baictéir i ngach cill bheag. Roghnaíonn gach seomra comhairimh 5 chealla lár (roghnach 4 choirnéal agus lárchill amháin sa lár) le haghaidh comhairimh. Go ginearálta ní dhéantar na cealla atá suite ar an líne greille a chomhaireamh ach ar na línte uachtaracha agus ar dheis. I gcás óga giosta, nuair a shroicheann méid na bachlóg leath na máthairchill, déantar é a chomhaireamh mar dhá chill bhaictéarach. Chun sampla a chomhaireamh, ríomh cion baictéarach an tsampla tríd an meánluach ón dá sheomra chomhairimh a ríomh.
5. Nigh an comhaireamh cille fola
Tar éis é a úsáid, sruthlaigh an bord comhaireamh cille fola le huisce sa sconna, ná scrobarnach le rudaí crua, agus é a thriomú leat féin nó le triomadóir gruaige tar éis níocháin. Scrúdú micreascópach féachaint an bhfuil baictéir iarmharacha nó dríodar eile i ngach cill bheag. Mura bhfuil sé glan, ní mór é a nite arís agus arís eile go dtí go bhfuil sé glan.
