An difríocht idir micreascópacht fhluaraiseachta agus micreascópacht thraidisiúnta
Rinne mé iarracht le déanaí roinnt codanna reoite de lucha a dhéanamh, agus anois ní mór dom micreascóp fluaraiseachta a úsáid le feiceáil an bhfuil an víreas a instealladh mé sa limistéar inchinn atá ag teastáil. Is gá staidéar a dhéanamh go hachomair ar roinnt bunphrionsabail de mhicreascópacht fhluaraiseachta, agus roinnfidh mé anseo iad freisin.
Úsáideann micreascóp fluaraiseachta solas ultraivialait mar fhoinse solais chun an réad atá á thástáil a shoilsiú, rud a fhágann go n-astú foinse solais an réad, agus ansin an réad a urramú faoin micreascóp. Úsáidtear go príomha le haghaidh cealla inmunofluorescence, tá sé comhdhéanta de fhoinse solais, córas pláta scagaire, agus córas optúil chun íomhá fluaraiseachta an tsampla a urramú trí mhéadú an eyepiece agus lionsa oibiachtúil. Breathnaímid ar an difríocht idir an micreascóp fluaraiseachta seo agus micreascóp optúil rialta.
1. Ó thaobh modhanna soilsithe
Tá modh soilsithe micreascóp fluaraiseachta go ginearálta ag baint úsáide as modh bhíoma titim, rud a chiallaíonn go ndéantar an fhoinse solais a réamh-mheastachán ar an sampla tástála tríd an lionsa cuspóir.
2. Ó thaobh rúin
Úsáideann micreascóp fluaraiseachta solas ultraivialait mar an fhoinse solais, le tonnfhad réasúnta gearr ach réiteach níos airde ná gnáth-mhicreascóip optúla.
3. Difríochtaí ar an scagaire
Úsáideann micreascóp fluaraiseachta dhá scagairí speisialta, ceann amháin os comhair an fhoinse solais chun solas infheicthe a scagadh, agus an ceann eile idir an cuspóir agus an eyepiece chun solas ultraivialait a scagadh, is féidir leis na súile a chosaint.
Is cineál micreascóp optúla é micreascópacht fhluaraiseachta freisin, go príomha toisc go bhfuil an tonnfhad corraithe ag micreascópacht fhluaraiseachta gearr, rud a fhágann go bhfuil difríochtaí i struchtúr agus úsáid micreascópachta fluaraiseachta agus gnáth-mhicreascópachta. Tá feidhm mhaith ag formhór na micreascóip fluaraiseachta solas lag a ghabháil, agus mar sin tá a gcumas íomháithe go maith freisin faoi fhluaraiseacht thar a bheith lag. Ina theannta sin, le feabhas leanúnach ar mhicreascópacht fluaraiseachta le blianta beaga anuas, laghdaíodh an torann go suntasach freisin. Dá bhrí sin, tá níos mó agus níos mó micreascóip fluaraiseachta á gcur i bhfeidhm.
Eolas a bhaineann le micreascópacht fhluaraiseachta dhá fhótón
Is é bunphrionsabal excitation dhá fhótón ná go bhféadfaidh móilíní fluaraiseacha dhá fhótón tonnfhad fada a ionsú ag an am céanna ag dlús ard fótóin, agus tar éis tréimhse ghearr de shaolré an stáit corraithe mar a thugtar air, scaoileann siad fótón tonnfhad níos giorra; Tá a éifeacht mar an gcéanna le fótón a úsáid le tonnfhad leath an tonnfhaid fhada chun móilíní fluaraiseacha a spreagadh. Éilíonn dhá excitation fótóin dlús fótóin ard, agus chun cealla damáiste a sheachaint, úsáidtear léasair pulse modh-ghlas ard-fhuinnimh i micreascóp dhá fhótón. Tá buaicfhuinneamh ard agus meánfhuinneamh íseal ag an léasair a astaítear leis an gcineál seo léasair, agus níl ach leithead cuisle de 100 femtoseconds agus minicíocht suas le 80 go 100 megahertz. Nuair a úsáidtear cuspóir Cró ard uimhriúil chun na fótóin léasair pulsed a dhíriú, is é an dlús fótóin ag pointe fócasach an chuspóra an ceann is airde, agus ní tharlaíonn excitation dhá fhótón ach ag pointe fócasach an chuspóra. Dá bhrí sin, ní gá pinholes confocal a bheith ag micreascóp dhá fhótón, rud a fheabhsaíonn éifeachtacht braite fluaraiseachta.
I bhfeiniméin fhluaraiseachta ginearálta, mar gheall ar an dlús fótóin íseal excitation, ní féidir le móilín fluaraiseacha ach fótón amháin a ionsú ag an am céanna, agus ansin fótón fluaraiseachta amháin a astú trí aistriú radaíochta, ar a dtugtar fluaraiseacht fótóin amháin. Maidir leis an bpróiseas excitation fluaraiseachta ag baint úsáide as léasair mar an fhoinse solais, d'fhéadfadh feiniméin fluaraiseachta dhá fhótón nó fiú multiphoton tarlú. Ag an am seo, tá an fhoinse solais excitation a úsáidtear ard-déine, agus comhlíonann an dlús fótóin an ceanglas maidir le móilíní fluaraiseacha chun dhá fhótón a ionsú ag an am céanna. Sa phróiseas maidir le léasair tipiciúil a úsáid mar fhoinse solais excitation, níl an dlús fótóin fós leordhóthanach chun feiniméan ionsú dhá fhótón a ghiniúint. De ghnáth, úsáidtear léasair femtosecond pulse, agus is féidir lena gcumhacht mheandarach leibhéal na meigeavata a bhaint amach. Dá bhrí sin, tá an tonnfhad de fhluaraiseacht dhá fhótón níos giorra ná sin de excitation, atá comhionann leis an éifeacht a tháirgtear trí leath excitation tonnfhad excitation.
