Conas an micreascóp fluaraiseachta cuí a roghnú
Is trealamh íomháithe micreascópach caighdeánach é micreascóp fluaraiseachta i saotharlanna agus ranna paiteolaíochta, a úsáideann tréithe fluaraiseachta le haghaidh breathnóireachta agus íomháithe. Úsáidtear go forleathan é i réimsí éagsúla cosúil le bitheolaíocht cille, néarbhitheolaíocht, luibheolaíocht, micribhitheolaíocht, paiteolaíocht, géineolaíocht, etc. Tá na buntáistí a bhaineann le híogaireacht agus sainiúlacht ard ag íomháú fluaraiseachta, rud a fhágann go bhfuil sé an-oiriúnach chun dáileadh próitéiní sonracha, organelles, etc. . i bhfíocháin agus i gcealla, ag déanamh staidéir ar chomh-logánú agus ar idirghníomhaíochtaí, ag rianú próisis dinimiciúla saoil ar nós athruithe tiúchana ian, agus mar sin de.
Roghnú micreascóip
Roinntear micreascóip fhluaraiseachta go príomha i dtrí chatagóir: micreascóip fhluaraiseachta ina seasamh (oiriúnach do slicing), micreascóip fhluaraiseachta inbhéartaithe (oiriúnach do chealla beo agus freisin le haghaidh slicing), agus micreascóip fluaraiseachta steirió (oiriúnach d'eiseamail níos mó, mar shampla plandaí, zebrafish (duine fásta / suthach), medaka, orgáin lucha/francaigh, etc.).
Roghnú na scagairí fluaraiseacha
Níor cheart go mbreathnódh roghnú na mbloc scagaire ní hamháin ar thonnfhad excitation agus astaithe na tóireadóirí fluaraiseacha, ach freisin a mheas an bhfuil excitation neamh-shonrach agus an bhfuil crosstalk dath le haghaidh samplaí lipéadaithe il-datha. Sa turgnamh, roghnóimid an tonnfhad is gaire don bhuaic excitation an oiread agus is féidir le haghaidh excitation, agus ba cheart go n-áireofaí sa raon glactha an buaic astaíochta. Is é 500nm an buaic excitation de Alexa Fluor 488, agus is féidir scagaire excitation 480/40 a roghnú i micreascóp fluaraiseachta. Is féidir na bloic scagaire fluaraiseacha a úsáidtear go coitianta i micreascópacht fluaraiseachta a roinnt ina dhá chineál: pas fada (LP) agus pas banna (BP), a chaithfear a roghnú freisin de réir riachtanas.
micreascóp comhfhócasach
I dtuairimí micreascópachta fluaraiseachta traidisiúnta, mar gheall ar fhorluí substaintí lipéadaithe fluaraiseacha agus struchtúir fhluaraiseachta spontáineacha, tá siad ceangailte go docht le chéile. Mar sin féin, ní hamháin go mbailíonn cuspóirí micreascópachta fluaraiseachta traidisiúnta ag titim solas ón eitleán fócasach, ach freisin scaipeann siad solas suas agus síos an eitleán fócasach, rud a fhágann go laghdaítear go mór réiteach íomhá agus codarsnacht.
Ní bhraitheann íomháú comhfhócasach ach an solas a léirítear ón eitleán féinfhócasach, rud a réitíonn an fhadhb thuas. Cruthaíonn an fhoinse solais láthair beag agus fíneáil ar an eitleán fócasach trí pholl bioráin, agus bailítear an solas a astaítear ón eitleán fócasach tríd an lionsa oibiachtúil. Ní féidir leis an gcuid is mó den fhluaraiseacht a astaítear ó phointí os cionn nó faoi phlána fócasach an lionsa oibiachtaigh teacht le chéile leis an bpoll bioráin. Ní féidir ach an fhluaraiseacht atá suite sa phlána fócasach agus cuid bheag den fhluaraiseacht dífhócasaithe dul tríd an bpoll bioráin, agus coinbhéirsíonn an léas solais lasmuigh den eitleán fócasach os comhair nó taobh thiar den phláta bioráin agus cuirtear bac air dul isteach sa bhrathadóir tríd an bpoll bioráin. Tá an íomhá braite ón eitleán fócasach, mar sin tá an caighdeán íomhá deiridh feabhsaithe go mór.
Mar gheall ar na buntáistí agus na praiticiúlacht éagsúla a bhaineann le micreascópacht chomhfhócasach scanadh léasair, tá sé ina chúntóir turgnamhach fíor-riachtanach faoi láthair i mbitheolaíocht cille ard-chruinneas, luibheolaíocht, agus réimsí taighde cille. Ag an am céanna, in ionaid taighde eolaíochta sa todhchaí, beidh sé mar an uirlis taighde is bunúsaí agus is bunúsaí.
