Comhaireamh díreach micreascóp micribhitheolaíochta
Prionsabal turgnamhach
Is modh comhairimh mhiocróbach a úsáidtear go coitianta é comhaireamh díreach faoi mhicreascóp ag baint úsáide as haemocytometer. Is é an leas a bhaint as an modh seo ná go bhfuil sé iomasach agus tapa. Cuir an fionraí baictéarach caolaithe go cuí (nó fionraí spóir) sa seomra comhaireamh idir an sleamhnán agus gloine chlúdach an haemocytometer, agus comhaireamh faoin micreascóp. Ós rud é go bhfuil toirt an tseomra comhairimh socraithe (0.1mm2), is féidir é a thiontú ina líon iomlán miocrorgánach in aghaidh an aonaid toirte de réir líon na miocrorgánach a breathnaíodh faoin micreascóp. Toisc go n-áirítear an modh seo suim na baictéir beo agus marbh, tugtar modh comhaireamh iomlán na mbaictéar air freisin.
Is sleamhnán gloine speisialta é haemocytometer de ghnáth ar a ndéanann ceithre grooves trí ardán. Tá an t-ardán sa lár roinnte ina dhá leath ag groove gearr cothrománach. Tá greille greanta ar an ardán ar gach taobh. Tá gach greille roinnte ina naoi gcearnóg mhóra. Is í an chearnóg mhór sa lár an seomra comhairimh. Déantar miocrorgánaigh a chomhaireamh sa seomra comhairimh.
Tá dhá shainiúlacht ag scála an tseomra comhairimh i gcoitinne, is é ceann amháin go bhfuil cearnóg mór roinnte ina 16 cearnach lár, agus tá gach cearnóg lár roinnte ina 25 cearnach beag (Fíor Ⅷ-2); is cearnóg mhór í an ceann eile Tá an chearnóg roinnte ina 25 chearnóg lár, agus tá gach cearnóg láir roinnte ina 16 chearnóg bheag (Fíor Ⅷ-1, C). Ach is cuma cén cineál clár comhairimh, is ionann líon na gcearnóga beaga i ngach cearnóg mhór, is é sin, 16 × 25=400 cearnóga beaga.
Is é 1 mm fad taoibh gach cearnóg mhór, agus is é 1 mm2 achar gach cearnóg mhór. Tar éis an ghloine clúdaigh a chlúdach, is é 0.1 mm an airde idir an ghloine sleamhnáin agus an ghloine clúdaigh, mar sin is é 0.1mm3 méid an tseomra comhairimh.
Nuair a bhíonn tú ag comhaireamh, de ghnáth comhaireamh líon iomlán na baictéir sna cúig chearnóg lár, ansin meánluach gach lárchearnóg a fháil, agus ansin a iolrú faoi 16 nó 25 chun líon iomlán na baictéir a fháil i gcearnóg mór, agus ansin Tiontaigh go dtí an líon iomlán na baictéir i dtuaslagán baictéarach 1ml.
Trealamh saotharlainne
Hemocytometer, micreascóp, clúdach-duillín, ribeach steiriúla;
Ábhair Turgnamhach
Saccharomyces cerevisiae fionraí
Nós imeachta turgnamhach (modh comhairimh dhíreach micreascóp miocróbach)
1. caolú
Caolaigh i gceart an fionraí Saccharomyces cerevisiae. Mura bhfuil an réiteach baictéarach tiubh, ní gá é a chaolú.
2. Seomra comhaireamh micreascópach
Sula gcuirtear samplaí leis, déan iniúchadh micreascópach ar sheomra comhairimh an phláta comhairimh. Má tá salachar ann, ní mór é a ghlanadh roimh chomhaireamh.
3. cuir sampla
Clúdaigh an pláta hemocytometer glan agus tirim le gloine clúdaigh, agus ansin bain úsáid as dropper béal cúng steiriúil chun titim beag den tuaslagán caolaithe Saccharomyces cerevisiae a scaoileadh ó imeall an ghloine chlúdaigh (gan an iomarca), ionas go mbeidh an réiteach baictéir is gar don bhearna feadh na bearna. Téann osmosis ribeach isteach sa seomra comhaireamh leis féin, agus is féidir an seomra comhaireamh ginearálta a líonadh le leacht baictéarach. Bí cúramach gan boilgeoga aeir a bheith agat.
4. comhaireamh micreascóp
Tar éis scíthe ar feadh 5 nóiméad, cuir an hemocytometer ar stáitse an mhicreascóp, bain úsáid as lionsa ísealchumhachta ar dtús chun suíomh an tseomra comhairimh a fháil, agus ansin aistrigh chuig lionsa ardchumhachta le haghaidh comhaireamh. Má aimsítear go bhfuil an tuaslagán baictéarach ró-tiubh nó ró-tanaí roimh chomhaireamh, is gá an caolú a ath-choigeartú roimh chomhaireamh. Éilíonn an caolú sampla ginearálta thart
Tá 5-10 cealla oiriúnach. Roghnaíonn gach seomra comhairimh na baictéar i 5 ghreille lár (roghnach 4 chúinne agus ghreillí lárnacha) le haghaidh comhairimh. Go ginearálta ní dhéantar na baictéir ar an líne ghreille a chomhaireamh ach amháin ar na línte uachtaracha agus ar dheis. I gcás óglaigh giosta, nuair a shroicheann méid an chomhlachta bachlóga leath na máthairchill, comhairigh dhá bhaictéar. Comhair sampla chun cion baictéarach an tsampla a ríomh ó na luachanna a chomhaireamh sa dá sheomra chomhairimh.
5. An Hemocytometer a ghlanadh
Tar éis é a úsáid, sruthlaigh an pláta comhaireamh cille fola ar an faucet le scairdeanna uisce, ná é a nigh le rudaí crua, agus é a thriomú leat féin nó le triomadóir gruaige tar éis níocháin. Scrúdú micreascópach, breathnaigh an bhfuil baictéir iarmharacha nó dríodar eile i ngach cill. Mura bhfuil sé glan, ní mór é a nite arís agus arís eile go dtí go bhfuil sé glan.
