Teicnící staining agus breathnóireacht micreascópach ar mhiocrorgánaigh
Baictéir a dhathú Simplí
1 Cuspóirí
1.1 Na bunteicnící a bhaineann le smearadh agus smearadh miocróbach a fhoghlaim.
1.2 Chun an modh staining simplí baictéir a mháistir.
1.3 Chun aithne a chur ar shaintréithe moirfeolaíocha na mbaictéar, agus foghlaim úsáid scátháin ola agus teicnící oibríochta aiseiptigh a chomhdhlúthú.
2 Prionsabal Teicníc bhunúsach i dturgnaimh mhicribhitheolaíochta is ea smearadh agus smearadh na mbaictéar. Tá cealla na baictéir beag agus trédhearcach, ní furasta iad a aithint faoin ngnáthmhicreascóp solais, agus ní mór iad a dhaite. Úsáid dath amháin chun na baictéir a dhathú, ionas go mbeidh difríocht dath soiléir ag an orgánach dhaite agus an cúlra, ionas gur féidir a mhoirfeolaíocht agus a struchtúr a fheiceáil níos soiléire. Tá an modh seo éasca le feidhmiú agus tá sé oiriúnach chun cruth ginearálta an orgánaigh a bhreathnú agus socrú na baictéir. Úsáidtear ruaimeanna alcaileach go coitianta le haghaidh staining simplí, mar gheall ar réitigh neodracha, alcaileach nó lag aigéadach, is gnách go ndéantar cealla baictéaracha a mhuirearú go diúltach, agus nuair a bhíonn ruaimeanna alcaileach ianaithe, gearrtar an chuid staining dá móilíní go dearfach, mar sin tá an chuid staining de ruaimeanna alcaileach. Is féidir ceangal go héasca leis na baictéir a dhéanamh ar an baictéar daite. Tá codarsnacht mhór idir na cealla baictéaracha daite agus an chúlra agus is fusa iad a aithint faoin micreascóp. I measc na ruaimeanna a úsáidtear go coitianta le haghaidh staining simplí tá gorm merocyanine, Violet criostail, agus dearg cumaisc bhunúsach. Nuair a bheidh an dianscaoileadh baictéarach de siúcra aigéad a tháirgeadh ionas go laghduithe an pH an mheán, méadaíonn an muirear dearfach ar an baictéar, agus ansin is féidir a úsáid i dearg, dearg aigéadach nó Chongó dearg agus ruaimeanna aigéadach eile staining. Ní mór na baictéir a shocrú roimh staining. Tá dhá chuspóir aige: is é ceann amháin na baictéir a mharú agus na baictéir a dhéanamh cloí leis an sleamhnán; is é an dara ceann ná a cleamhnas don dath a mhéadú. Úsáidtear dhá mhodh go coitianta: téamh agus fosúchán ceimiceach. Déan iarracht mhoirfeolaíocht bhunaidh na gcealla a choinneáil agus iad á shocrú.
3 Ábhair
3.1 Strain Bacillus subtilis 12-18h cultúr leataobhach agar cothaitheach, Staphylococcus aureus thart ar 24h cultúr leataobhach agar cothaitheach, Escherichia coli 24h cultúr leataobhach agar cothaitheach, báicéir giosta agar cultúr slant.
3.2 stain gorm meitiléine alcaileach Stain Lue (nó stain Violet criostail oxalate amóiniam), stain dearg cumaisc aigéid charbóil.
3.3 Ionstraimí nó paraphernalia eile Micreascóp, lampa alcóil, sleamhnán, fáinne ionaclaithe, sealbhóir sleamhnáin, buidéal ciseal dúbailte (líonadh le ola cedar agus xiléin), páipéar micreascóp, saline fiseolaíoch nó uisce driogtha, etc.
4 Nós Imeachta Smearaidh → triomú → fosúchán → staining → níocháin → triomú → scrúdú micreascópach.
5 Chéim
5.1 smearaidh Tóg dhá shleamhnán glan agus saor ó ola, gach ceann acu le titim beag de saline (nó uisce driogtha) i lár an sleamhnáin faoi choinníollacha aiseiptigh, le fáinne ionaclaithe chun oibriú aseptach, faoi seach, ón Bacillus subtilis, Garcinia micrococcus agus Escherichia coli slant a phiocadh caonach beag sa braon uisce, mheascadh agus brataithe le scannán. Má tá an fionraí baictéarach (nó cultúr leachtach) smearaidh is féidir, a úsáid chun ionaclaithe an fáinne Pioc 2 go 3 fáinní go díreach ar an sleamhnán. Tabhair faoi deara nár chóir an saline (uisce driogtha) agus a chur ar an baictéar a bheith i bhfad ró-agus scaipeadh go cothrom, ní ró-tiubh.
5.2 Triomú Triomaigh go nádúrtha ag teocht an tseomra. Is féidir é a thriomú freisin trí théamh beagán os cionn lampa alcóil leis an taobh brataithe suas. Mar sin féin, ná bí ró-ghar don lasair, toisc go bhfuil an teocht ró-ard scriosfaidh moirfeolaíocht na baictéir.
5.3 Fosúchán Má úsáidtear triomú teasa, cuirtear an fosúchán agus an triomú le chéile i gcéim amháin ar an mbealach céanna le triomú. Socrú smearaidh, tirim agus teasa.
5.4 Staining Cuir an sleamhnán cothrom ar an seilf sleamhnáin, cuir 1 go 2 bhrionglóid de thuaslagán stainse ar an smearaidh (clúdaíonn an réiteach staining díreach an scannán smearaidh). Samhlaigh an smearaidh le Mellanox Blue Bunúsach Lü ar feadh 1 ~ 2 nóiméad, agus le Carbónáit Dearg (nó Violet Criostail Amóiniam Oxalate) ar feadh thart ar 1 nóiméad.
5.5 Sruthlú Doirt amach an tuaslagán ruaimnithe agus sruthlaigh go réidh le huisce sconna ó thaobh amháin den sleamhnán go dtí go mbeidh an t-uisce a ritheann síos ón smearaidh gan dath. Nuair a bheidh tú ag sruthlú, ná lig an t-uisce sreabhadh go díreach chun an dromchla brataithe a nigh. Níor cheart go mbeadh an sreabhadh uisce ró-tapa nó ró-mhór chun an scannán smearaidh a scaoileadh amach.
5.6 Triomú Croith na braoiníní uisce ar an sleamhnán chun a thriomú go nádúrtha, is féidir páipéar tirim nó ionsúiteach a shéideadh a úsáid chun tirim a ionsú (bí cúramach gan an corp baictéarach a ghlanadh). 5.7 Scrúdú micreascópach Déantar an smearaidh a thriomú agus a scrúdú le micreascópacht. Caithfidh an smearaidh a bheith tirim go hiomlán sular féidir é a fheiceáil le micreascóp ola.
6 Torthaí Tarraing deilbhíocht E. coli agus Micrococcus garciniae tar éis staining aonair.
Gram stain
1 Cuspóir
1.1 Prionsabal stain Gram agus a thábhachtaí maidir le haicmiú agus aithint na mbaictéar a thuiscint.
1.2 Teicníc staining Gram a fhoghlaim agus a mháistir agus foghlaim úsáid lionsa ola an mhicreascóp solais a chomhdhlúthú.
